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Título

EFEITOS DA ESTIMULAÇÃO ELÉTRICA DE ALTA VOLTAGEM EM FERIDAS CUTÂNEAS DE RATAS DESNUTRIDAS E DESNUTRIDAS TRATADAS COM DIETA NORMOPROTEICA

Orientador

Profª Drª Maria Luiza Ozores Polacow

Autor

Silvia Belissa Ferrareto

Palavra chave

Desnutrição Proteica, Cicatrização de Feridas, Estimulação elétrica,...

Grupo CNPQ


Programa

MS - FISIOTERAPIA

Área

CIÊNCIAS DA SAÚDE

Data da defesa

24/02/2015

Nº Downloads

902

Resumo

A regeneração cutânea apresenta demanda significativa de processos e estruturas que dependem da disponibilidade de aminoácidos. A estimulação elétrica de alta voltagem (EEAV) é um recurso extensamente estudado e ratificado como eficaz na cicatrização de feridas cutâneas, mas é desconhecido o mecanismo de regeneração cutânea sob intervenção terapêutica em rato desnutrido e o comportamento tecidual frente à recuperação nutricional. O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da desnutrição na regeneração cutânea, da EEAV na desnutrição, bem como a associação com dieta normoproteica. Trinta e cinco ratas Wistar foram divididas igual e aleatoriamente em cinco grupos: Controle (C), Controle Tratado (CT), Desnutrido Controle (DC), Desnutrido Tratado (DT) Desnutrido Tratado em Recuperação (DTR). Os animais dos grupos DC, DT e DTR receberam dieta hipoproteica e os grupos C e CT dieta normoproteica, por 45 dias. Após esse período foi removido 1 cm2 de pele na região interescapular e 24 horas depois iniciada EEAV (100 Hz; polo alternado diariamente, iniciando pelo negativo; limiar motor; 30 minutos/dia), aplicada sete dias consecutivos. No grupo DTR foi administrada dieta normoproteica durante esse período e os demais mantiveram as dietas iniciais. A massa corporal foi mensurada inicialmente e a cada sete dias. Foi analisada a área da ferida no pós-operatório (PO) imediato, 4° e 8° dias PO, e determinado o Índice de Cicatrização da Úlcera (ICU). No 8º dia, após eutanásia, amostras de pele foram processadas histologicamente para mensuração da re-epitelização, espessura da epiderme e derme, contagem de fibroblastos e leucócitos, densidade de área de vasos sanguíneos e análise da birrefringência das fibras colágenas. Houve redução significativa no ganho ponderal dos animais desnutridos em relação aos controles após 45 dias e após o fim do período de EEAV, inclusive no grupo DTR. Todos os grupos apresentaram redução na área da ferida (p<0,05), porém o ICU não diferiu entre os grupos. Os grupos CT, DT e DTR apresentaram maior epitelização comparados ao C (p<0,05), e a medida de “effect size” mostrou que a desnutrição produziu um efeito positivo na re-epitelização. Já a espessura do epitélio foi menor nos grupos DC e DT em relação à C e CT (p<0,05) e o grupo DTR atingiu os valores de C e CT, apresentando espessura maior comparado ao DC (p<0,05). Na derme, houve redução na espessura do grupo DC em relação aos controles (p<0,05), enquanto DT e DTR mostraram valores equivalentes a estes. Os grupos DT e DTR apresentaram maior densidade de vasos comparados ao C (p<0,05), e, em relação ao perfil numérico das células, a média dos leucócitos não foi diferente entre os grupos, e a de fibroblastos foi significativamente maior nos grupos CT e DTR em relação ao DC, resultado semelhante ao apresentado pela birrefringência das fibras colágenas. Pode-se concluir que a desnutrição influenciou negativamente na epitelização da ferida, assim como na derme, promovendo um tecido pouco estruturado. A aplicação de EEAV e intervenção nutricional minimizaram os efeitos da desnutrição no processo cicatricial, resultando em epiderme e derme histologicamente mais estruturadas.

Abstract

The skin regeneration presents a significant demand of processes and structures that depend on the availability of amino acid. The high volt electrical stimulation (HVES) is an alternative widely studied and proved to be efficient in healing of skin ulcers, but the skin regeneration mechanism in therapeutic intervention in underfed rats and tissue behavior concerning nutritional recovery is unknown. The objective of this study was to analyze the effects of malnutrition in skin regeneration, the HVES on malnourished, as well as the association with a normoprotein diet. Thirty-five female Wistar rats were divided equally and randomly into 5 groups: control (C), treated control (TC), Malnourished Control (MC), Malnourished Treated (MT) Malnourished Treated in Recovery (MTR). The animal from groups MC, MT and MTR received hypoproteic diet and groups C and TC normoprotein diet, for 45 days. After this period, 1 cm2 of skin was removed from the interscapular area, and 24 hours later, started HVES (100 Hz, daily alternating current, starting from the negative; motor threshold; 30 minutes/day), applied 7 consecutive days. In the MTR group, it was administrated a normoprotein diet during this period while the other groups remained with their initial diets. Body mass was measured initially and every 7 days. The wound areas from the postoperative (PO) were analyzed immediately, 4th day PO and 8th day PO, and determined the wound healing rate (WHR). On day 8, after euthanasia, skin samples were processed histologically for measurement of reepithelialization, thickness of the epidermis and dermis, fibroblasts and leukocytes count, blood vessel area density and analyses of the birefringence of collagen fibers. There was a significant reduction in weight gain in malnourished animals compared to controls after 45 days and after the HVES period, even in the MTR group. All groups showed a reduction in the wound area (p<0.05), but the WHR did not alter between groups. The groups TC, MT, MTR had higher epithelization compared to C (p<0.05), and the measurement of "effect size" showed that malnutrition had a positive effect on reepithelialization. However, the thickness of the epithelium was lower in MC and MT groups compared with C and TC (p<0.05) and the MTR group reached C and TC values, with higher thickness compared to MC (p<0.05). As for dermis, there was a reduction in the thickness of the MC group compared to controls (p<0.05), while MT and MTR showed similar values to these. The MT and MTR groups showed higher density of vessels compared to C (p<0.05), and compared to the cells profile number, the average of leukocytes was not different between the groups while fibroblasts average was significantly increased in TC and MTR groups comparing to MC, results similar to that presented by the birefringence of collagen fibers. It can be concluded that malnutrition negatively influenced the epithelialization of the wound, and the dermis as well, resulting in an unstructured tissue. The application of HVES and protein nutritional intervention minimized the effects of malnutrition during the healing process, resulting in epidermis and dermis histologically more structured.