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Título
INFLUÊNCIA DA ESTIMULAÇÃO ELÉTRICA DE ALTA VOLTAGEM E DO ÁCIDO LIPÓICO NA RECUPERAÇÃO MORFOLÓGICA E FUNCIONAL DO NERVO ISQUIÁTICO DE RATOS APÓS AUTOENXERTO DE NERVO
Orientador
Rosana Macher Teodori
Autor
ELVYNA MELO RÊGO
Palavra chave
Plasticidade neuronal, estimulação elétrica, ácido lipóico, regeneração nervosa,
Grupo CNPQ
Programa
MS - FISIOTERAPIA
Área
CIÊNCIAS DA SAÚDE
Data da defesa
01/01/2012
Nº Downloads
1749
Resumo
O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da Estimulação Elétrica de Alta Voltagem (EEAV) e do Ácido α-Lipóico (LA), bem como da associação de ambos, sobre as características morfométricas e funcionais do nervo isquiático de ratos após autoenxerto de nervo. Trinta ratos Wistar (198 ± 12 g), foram divididos em 6 grupos, (n=5), Controle normal (CON), Controle Ácido Lipóico (AL), Lesão + Autoenxerto de Nervo (E), Lesão + Autoenxerto de Nervo + Estimulação Elétrica de Alta Voltagem (E+AV), Lesão + Autoenxerto de Nervo + Ácido Lipóico (E+AL) e Lesão + Autoenxerto de Nervo + EEAV + Ácido Lipóico (E+AV+AL). Após anestesia (cloridrato de ketamina – 1,16 g/10mL e cloridrato de xilazina – 2 g/100 mL, proporção 3:2, dose = 0,09 mL/100g peso e 0,06 mL/100g peso, respectivamente), o isquiático esquerdo dos animais dos grupos E, E+AV, E+AL e E+AV+AL foi seccionado, sendo retirado um segmento de 8 mm, que foi invertido e reconectado por 2 pontos de sutura epineural em cada extremidade. Após 24 horas da lesão os animais dos grupos, E+AV e E+AV+AL receberam EEAV por estimulação catódica até o limiar motor durante 30 min (Frequência de 100 Hz; Voltagem de 100 V, sendo a duração de pulso e intervalo interpulso predeterminados pelo equipamento), 5 vezes por semana, durante 8 semanas. Aos animais dos grupos, AL, E+AL e E+AV+AL, foi administrada uma solução de ácido α-lipóico, por via intraperitoneal, numa concentração de 40mg/kg, após 24 horas da lesão, 5 vezes por semana durante 8 semanas. Realizou-se o registro da marcha (pré-operatório, 7º, 28º, 35º, 42º, 49º, 56º, 63° dias de pós-operatório (PO). O nervo isquiático de todos animais foi processado para microscopia de luz para análise morfométrica e quantitativa. Os dados morfométricos e funcionais foram processados (STATISTICA, version 10). Para análise de número de axônio e diâmetro do axônio foi realizado análise de variância de Kruskal-Wallis seguido do teste de Dunn. Para as variáveis diâmetro da fibra, razão G, espessura da bainha e IFC utilizou-se o teste (F) seguido de Tukey HSD. Considerou-se p<0,05. O número mediano de axônios no grupo E+AV não diferiu daquele do grupo E (p>0,05), tendo sido maior em relação a todos os outros grupos (p<0,05). No grupo E+AV+AL o número de axônios foi menor que em todos os demais grupos (p<0,05), não tendo diferido do grupo CON (p>0,05). Os demais grupos não diferiram entre si (p>0,05). O diâmetro dos axônios, diâmetro das fibras nervosas e a espessura das bainhas de mielina não atingiram os valores controle em todos os grupos lesionados, não havendo diferença entre os grupos (p>0,05). A razão G foi semelhante em todos os grupos (p=0,2045). Após 8 semanas de intervenção, nenhum grupo desnervado recuperou a funcionalidade. Conclui-se que a EEAV e o ácido lipóico, não influenciaram a maturação das fibras nervosas regeneradas após neurotmese, bem como a recuperação funcional.
Abstract
The purpose of this study was to investigate the effects of High Voltage Electrical Stimulation (EEAV) and α-lipoic acid (LA), as well as the association of both, on morphometric and functional characteristics of the sciatic nerve of rats after nerve autograft. Thirty Wistar rats (198 ± 12 g), were divided into 6 groups, (n=5), normal control (CON), thioctic Acid Control (AL), Injury + Nerve Autografts (E), Injury + Nerve Autografts + High Voltage Electrical Stimulation (E+AV), Injury + Nerve Autografts + thioctic acid (E+AL) and injury + Nerve Autografts + HVES + thioctic acid (E+AV+AL). After anesthesia (ketamine hydrochloride - 1.16 g/10mL and xylazine 2 g/100 mL, ratio 3:2, dose = 0.09 mL/100g weight and 0.06 mL/100g weight, respectively), the left sciatic nerve from animals of groups E, E+AV, E+AL and E+AV+AL was sectioned, and removed a segment of 8 mm, which was inverted and reattached by two epineural stitches at each end. After 24 hours of the lesion, the groups of animals E+AV and E+AV+AL received HVES cathodic stimulation up to the motor threshold for 30 min (Frequency 100 Hz, 100 V voltage, and the pulse duration and interpulse interval predetermined by the equipment), 5 times a week, for 8 weeks. In the animals of groups, AL, E+AL and E+AV+AL, were administered a solution of thioctic acid intraperitoneally at a concentration of 40mg/kg, 24 hours after injury, five times a week for 8 weeks. Held the record of movement (preoperative, 7°, 28°, 35°, 42°, 49°, 56°, 63° days postoperatively (PO). The sciatic nerve of all animals were processed for light microscopy and quantitative morphometric analysis. Morphometric and functional data were processed (STATISTICA, version 10). For analysis of axon number and axon diameter was performed analysis of variance Kruskal-Wallis test followed by Dunn. For the diameter of the fiber, G ratio, thickness of the sheath and SFI, we used the test (F) followed by Tukey HSD. We considered p <0.05. The median number of axons in the E+AV group did not differ from that of group E (p> 0.05) and were higher than in all other groups (p <0.05). In group E+AV+AL the number of axons was lower than in all other groups (p <0.05), having not differed from the CON group (p> 0.05). The other groups did not differ (p> 0.05). The diameter of axons, nerve fiber diameter and thickness of myelin sheaths did not reach the control values in all groups injured and no difference between groups was found (p> 0.05). The G ratio was similar in all groups (p = 0.2045). After 8 weeks of intervention, no group denervated regained functionality. In conclusion, the HVES and thioctic acid, did not affect the maturation of nerve fibers regenerated after neurotmesis, as well as functional recovery.
