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Título

AVALIAÇÃO DA REGENERAÇÃO MUSCULAR EM RATOS EXPOSTOS A NICOTINA E TRATADOS COM LASER DE BAIXA INTENSIDADE

Orientador

Adriana Pertille

Autor

THIAGO SANTOS COHÉN

Palavra chave

nicotina, regeneração muscular, fisioterapia, laser de baixa intensidade

Grupo CNPQ


Programa

MS - FISIOTERAPIA

Área

CIÊNCIAS DA SAÚDE

Data da defesa

25/03/2013

Nº Downloads

2225

Resumo

A nicotina quando em uso contínuo pelo fumante, possui grande capacidade limitante das funções homeostáticas, promovendo ação depressora do sistema nervoso central podendo provocar alterações na atividade elétrica cardíaca e na pressão arterial, além de agir negativamente no processo de regeneração muscular. Nesse sentido, este estudo teve como objetivo investigar o comportamento elétrico cardíaco e ajustes da pressão arterial, e analisar a regeneração muscular através do tratamento com laser de baixa intensidade no músculo tibial anterior de ratos submetidos à ingestão de nicotina por 18 semanas, após criolesão. Foram utilizados 35 ratos com 5 semanas de idade. Os animais foram divididos em 7 grupos : controle (CT) submetidos somente a ingestão de nicotina; lesão 3 e 7 dias (LE3 e LE7) submetidos à ingestão de nicotina e lesão muscular; laser 3 e 7 dias (LA3 e LA7) submetidos à ingestão de nicotina, lesão muscular e tratados com laser de diodo GaAlAs a cada 48 horas; sham 3 e 7 dias (SH3 e SH7) submetidos à ingestão de nicotina, lesão muscular e simulação do tratamento com laser, os grupos SH3 e LA3 receberam apenas uma aplicação/simulação e os respectivos grupos 7 dias receberam 3 sessões. Antes da divisão dos grupos foi avaliada a atividade elétrica cardíaca (ECG) e medida a pressão arterial dos animais. Para o procedimento de lesão muscular utilizou-se o método de criolesão do músculo tibial anterior direito. A análise da regeneração muscular foi analisada 3 e 7 dias após a lesão, através de microscopia de luz e immunoblotting. Para análise estatística utilizou-se os testes ANOVA one-way e Tukey para os dados com distribuição normal, nos dados com distribuição não normal utilizou-se os testes Kruskal-Wallis e SNK, adotando um valor de p<0,05. Nos resultados do ECG foram constatados aumento de 39% na frequência cardíaca, como também aumento de 40% no intervalo QRS e 33% no segmento PR, a partir do 4º dia de ingesta de nicotina. A partir do 3º dia de ingesta verificou-se uma significativa elevação tanto na pressão sistólica quanto diastólica. Em relação a área de secção transversa o grupo laser 7 dias diferiu estatisticamente apresentando maior número de fibras com área entre 1201 e 1800 µm² em relação aos grupos de mesmo período, e menor quantidade de fibras com área entre 300 e 600 µm² em relação ao grupo SH7. Três dias após a lesão o grupo LA3 diferiu dos demais grupos apresentando maior quantidade de fibras com área entre 101 e 300 µm² e menor quantidade entre 0 e 100 µm². A análise histológica mostrou que não houve diferença na área de inflamação/regeneração total entre os grupos, e quanto ao percentual de tecido conjuntivo, observou-se no grupo LA7 menor valor quando comparado aos outros grupos. O grupo controle diferiu dos demais grupos em todas as análises realizadas. A análise molecular evidenciou que o conteúdo de TGF-β1 nos grupos sham foi significativamente maior que nos outros grupos. Conclui-se que poucos dias de uso de nicotina são suficientes para provocar alterações hemodinâmicas, como o aumento da pressão arterial e uma sobrecarga cardíaca, e que para este modelo experimental o tratamento com laser foi efetivo no processo de regeneração muscular, pois favoreceu a maturação das fibras em regeneração e reduziu a quantidade de tecido conjuntivo. Palavras-chave: nicotina, regeneração muscular, fisioterapia, laser de baixa intensidade

Abstract

The nicotine when used continuously by the smoker, has great limiting capacity of the homeostatic functions, promoting depressing action of the central nervous system, which can cause changes in the cardiac electrical activity and blood pressure, besides acting negatively in the process of muscle recovery. Thus, this study had as an objective to investigate the cardiac electrical behavior and adjustments of the blood pressure, as well as to analyze the muscle recovery through treatment with low intensity laser at the anterior tibia muscle of rats submitted to the ingestion of nicotine for 18 weeks, after cryoinjury. 35 five-week-old rats were used. The animals were divided in 7 groups: control (CT) submitted only to the ingestion of nicotine; Injury 3 and 7 days (LE3 and LE7) submitted to the ingestion of nicotine and muscle injury; Laser 3 and 7 days (LA3 and LA7) submitted to the ingestion of nicotine, muscle injury and treated with GaAIAs diode laser every 48 hours; sham 3 and 7 days (SH3 and SH7) submitted to the ingestion of nicotine, muscle injury and laser treatment simulation, the groups SH3 and LA3 received only one application/simulation and the respective groups 7 days received 3 sessions. Before the group division, the cardiac electrical activity was evaluated as well as the blood pressure measurement of the animals. For the procedure of muscle injury, it was used the cryoinjury method of the right anterior tibia muscle. The analysis of the muscle recovery was analyzed 3 and 7 days after the injury, through light microscopy and immunoblotting. For the statistical analysis, it was used the ANOVA one-way tests and Tukey for the data with normal distribution, on the data with abnormal distribution, it was used the Kruskal-Wallis and SNK tests, adopting a value of p<0, 05. On the results of ECG, it was found out an increase of 39% in the heart rate as well as an increase of 40% in the QRS interval and 33% in the PR segment, from the 4th day of nicotine ingestion. From the 3rd of ingestion it was verified a significant increase both in the systolic pressure and the diastolic one. In relation to the area of transversal section the laser group 7 days differed statistically presenting higher number of fibers with area between 1201 and 1800 µm² in relation to the groups from the same period, and lower amount of fibers with area between 300 and 600 µm² in relation to the group SH7. Three days after the injury the group LA3 difered from the other groups presenting higher amount of fibers with área between 101 and 300 µm² and lower amount between 0 and 100 µm². The histological analysis showed that there was no difference in the area of total inflammation/ regeneration among the groups, and as for the percent of the conjunctive tissue, it was observed in the LA7 group a smaller value when compared to the other groups. The control group differed from the other groups in all the practiced analyses. The molecular analysis evidenced that the content of TGF-β1 on the sham groups was significantly higher than the other groups. It was concluded that few days of nicotine use are enough to cause hemodynamic changes, such as increase of the blood pressure and a cardiac overcharge, and that for this experimental model the treatment with laser was effective in the process of muscle recovery because it favored the maturation of the fibers in regeneration and reduced the amount of conjunctive tissue.