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Título
Avaliação das Proteínas Musculares Fosforiladas, da Condição Cardíaca e
Pulmonar de Ratos com Escoliose
Orientador
Prof. Dr. Carlos Alberto da Silva
Autor
VÍTOR ALEXANDRE PEZOLATO
Palavra chave
Escoliose, ratos, insulina, músculo, metabolismo.
Grupo CNPQ
Programa
MS - FISIOTERAPIA
Área
CIÊNCIAS DA SAÚDE
Data da defesa
19/12/2014
Nº Downloads
917
Resumo
Escoliose é a condição caracterizada pela disfunção da coluna vertebral em
caráter tridimensional, sendo que afeta crianças e adolescentes no mundo todo.
Caso não seja tratada desde o início, torna-se uma condição altamente
incapacitante. O objetivo do presente estudo foi induzir escoliose em ratos por
meio de metodologia não invasiva, a fim de se conhecer as alterações angulares
da coluna, o comportamento metabólico que acompanham o quadro escoliótico,
bem como o perfil proteico das enzimas fosforiladas mTOR, AKT, P70S6K, IRS-1
e AMP, além da densidade alveolar e padrões eletrocardiográficos. Os animais
foram distribuídos em grupos (n=10), a saber: controle e escoliótico. Os animais
escolióticos receberam o dispositivo indutor, que foi trocado semanalmente até o
fim do período de indução de 12 semanas. Foi realizada inclinação e flexão para o
lado direito, formando a curvatura em “C“, que foi avaliada em exames
radiológicos. O comportamento elétrico do coração foi avaliado em exame
eletrocardiográfico e o glicogênio muscular pelo método do fenol sulfúrico. Houve
análise histológica do tecido pulmonar e do músculo paravertebral. A fosforilação
das enzimas AKT, MAP, mTOR e P70S6K também foram avaliadas e após a
revelação das autorradiografias, as bandas identificadas foram quantificadas por
meio de densitometria óptica. Os dados passaram pelo tratamento estatístico,
iniciando pelo teste de normalidade de Shapiro-Wilk seguido da analise de
variância de duas vias (Two-way ANOVA) e teste de Sidak. Em todos os cálculos
foi fixado um nível crítico de 5%. Os resultados mostraram que o peso corporal
médio dos animais escolióticos foi 18% menor comparado aos animais controles.
Em relação à angulação da escoliose, o grupo escoliotico apresentou angulação
de 56º acompanhado de um desvio de 11º no eixo elétrico cardíaco, sem
alteração funcional na dinâmica cardíaca. Na avaliação metabólica, o grupo
escoliótico comparado ao controle, apresentou alteração significativa nas reservas
glicogênicas com maior intensidade na convexidade, onde os músculos
paravertebrais foram comprometidos de forma mais severa, o mesmo ocorreu
com a concentração de proteínas totais. Em relação a densidade da área alveolar,
o grupo escoliótico demonstrou valores significativamente inferiores, algo que não
ocorreu em relação a quantidade de fibras do músculo paravertebral. O perfil da
fosforilação das enzimas da via insulínica seguiu o perfil de modificações nas
reservas glicogênicas, bem como das proteínas totais. Conclui-se que a escoliose
é acompanhada de comprometimento na homeostasia metabólica e funcional da
musculatura devido a alterações no perfil enzimático e molecular desencadeados
concomitante ao processo de indução da curvatura.
Abstract
Scoliosis is a condition characterized by dysfunction of the spine in threedimensional
character, and affects children and adolescents worldwide. If not
treated early, it is highly disabling condition. The aim of this study was to induce
scoliosis in rats using noninvasive methodology, in order to know the angular
changes of the spine, the metabolic behavior that accompany the scoliotic
framework as well as the protein profile of phosphorylated enzyme mTOR , AKT,
p70S6K, IRS-1, AMP and electrocardiographic profile. The animals were divided
into groups (n = 10), namely: control and scoliotic. The scoliotic animals received
the inductor device, which was changed weekly until the end of the induction
period of 12 weeks. Inclination and bending to the right was made, forming the
curvature, which was evaluated in radiological examinations. The electrical
behavior of the heart was assessed by electrocardiographic examination and
muscle glycogen by the phenol sulfuric method. There histological analysis of lung
tissue and paravertebral muscle. Phosphorylation of AKT, AMPK, mTOR and
p70S6K enzymes were also evaluated and after the revelation of the
autoradiographs, the identified bands were quantified by densitometry. The data
passed through the statistical treatment, starting with the Shapiro-Wilk normality
followed by analysis of variance two-way (two-way ANOVA) and Sidak test. In all
calculations a critical level of 5% was set. The results showed that the average
body weight of scoliotic animals was 18% lower compared to the control animals.
Regarding the angle of scoliosis, the scoliotic group showed angulation of 56
accompanied by a deviation of 11 in cardiac electrical axis without functional
changes in cardiac dynamics. The metabolic assessment, the scoliotic group
compared with controls, had a significant change in glycogen reserves with greater
intensity in the convexity, where the paraspinal muscles were more severely
compromised, so did the total protein concentration. Regarding the density of the
alveolar area, the scoliotic group showed lower values, something that not
occurred on the amount of paraspinal muscle fibers. The profile of the
phosphorylation enzymes of insulin signaling has followed the modifications of the
profile of glycogen reserves and total protein. It is concluded that scoliosis is
accompanied by metabolic and functional impairment in muscle homeostasis due
to changes in enzyme profiles and the concomitant induction process triggered
molecular curvature.
