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Título

Efeito do Laser de Baixa Intensidade na Regeneração Muscular em Modelo Experimental Desnutrido/Recuperado

Orientador

Profa. Dra. Adriana Pertille

Autor

MAISA CARDOSO DA SILVA

Palavra chave

Desnutrição, Regeneração Muscular, terapia por luz de baixa intensidade

Grupo CNPQ


Programa

MS - CIÊNCIAS DO MOVIMENTO HUMANO

Área

CIÊNCIAS DA SAÚDE

Data da defesa

21/02/2017

Nº Downloads

658

Resumo

A desnutrição é uma condição decorrente de um aporte insuficiente de nutrientes ou de um inadequado aproveitamento biológico dos alimentos ingeridos, que gera déficits importantes no metabolismo, comprometendo os sistemas, incluindo o musculoesquelético. Considerando que a ocorrência de lesões musculares é um fato comum, uma opção de tratamento para a recuperação é a terapia por laser de baixa intensidade (Low-Level Laser Therapy – LLLT), que diminui o tempo de cicatrização e garante melhor reparo da lesão. Assim, o objetivo do trabalho foi analisar os efeitos da LLLT na recuperação muscular de ratos submetidos à desnutrição e recuperação proteica, por meio de análises morfológicas e bioquímicas. Foram utilizados 40 ratos Wistar, recém-desmamados, divididos aleatoriamente em dois grupos (n=20): Grupo Controle (C) submetido somente a dieta normoproteica (14%) e o Grupo Desnutrido/ Recuperado (D) submetido a dieta hipoproteica (6%) por 45 dias e recuperados por mais 45 dias com ração normoproteica (14%). Ao completar a fase de recuperação nutricional, todos os animais foram submetidos à criolesão no músculo tibial anterior direito, e subdivididos nos grupos (n=5): Controle Lesão (C), Controle Laser (CL), Desnutrido/Recuperado Lesão (D) e Desnutrido/Recuperado Laser (DL). Após 24 h da lesão, os grupos CL e DL receberam tratamento com LLLT diodo AsGaAl 830nm, na forma contínua, potência de 30mW e densidade de energia de 20J/cm², durante 80 segundos, em dias intercalados. Ao término do protocolo os animais foram eutanasiados 7 ou 21 dias após a lesão dependendo do grupo experimental. O músculo tibial anterior direito (lesado) foi retirado, pesado e dividido transversalmente em duas partes iguais, sendo uma parte destinada à técnica de microscopia de luz (HE) e a outra à técnica de immunobloting (marcação da citocinas TNF-α, TGF-β1 e proteína m-TOR). A avaliação dos resultados foi feita pelo teste ANOVA, com valor de p≤0,05 para significância estatística. Os resultados mostraram que os animais submetidos à dieta hipoproteica e recuperados apresentaram redução na massa corporal quando comparados aos animais submetidos à dieta normoproteica (p≤0,05). Aos 7 dias houve redução da inflamação e da TNF-α nos grupos controle e desnutrido 21 dias (p≤0,05), porém nos animais irradiados não houve esse resultado foi observado somente aos 21 dias, sem alteração nos valores de TNF-α. A Densidade de Área de Tecido Conjuntivo demonstrou o mesmo comportamento, porém os níveis de TGF-β1 não foram influenciados pela LLLT. A Área de Secção Transversa e a m-Thor aumentaram com o tratamento por LLLT nas fases finais da regeneração. Com os resultados do presente estudo pode-se concluir que a terapia com laser de baixa intensidade (830 nm) favoreceu a regeneração muscular na fase tardia (21 dias) em modelo experimental de desnutrição proteica pós-natal com posterior recuperação.

Abstract

Malnutrition is a condition due to an insufficient supply of nutrients or an inadequate biological utilization of the food ingested, which generates important deficits in the metabolism, compromising the systems, including the musculoskeletal system. Considering that the occurrence of muscle injuries is a common fact, a treatment option for recovery is Low Level Laser Therapy (LLLT), which decreases healing time and ensures better injury repair. Thus, the objective of this work was to analyze the effects of LLLT on the muscle recovery of rats subjected to malnutrition and protein recovery, through morphological and biochemical analyzes. Wistar rats were randomly divided into two groups (n = 20): Control Group (C) submitted to the normoprotein diet (14%) and the Undernourished / Recovered Group (D) submitted to a hypoprotein diet (6 %) For 45 days and recovered for another 45 days with normoproteic diet (14%). At the end of the nutritional recovery phase, all animals were submitted to cryolesion in the right tibialis muscle and subdivided into groups (n = 5): Control Lesion (C), Laser Control (CL), Malnutrition / And Malnourished / Recovered Laser (DL). After 24 h of injury, CL and DL groups were treated with LLLT 830nm diode AsGaAl, in continuous form, 30mW power and energy density of 20J / cm², for 80 seconds, on interspersed days. At the end of the protocol the animals were euthanized 7 or 21 days after injury depending on the experimental group. The right (injured) anterior tibial muscle was removed, weighted and divided transversely into two equal parts, one part being dedicated to the light microscopy (HE) technique and the other to the immunoblotting technique (TNF-α cytokine, TGF- Β1 and m-TOR protein). The ANOVA test was used to evaluate the results, with a value of p≤0.05 for statistical significance. The results showed that the animals submitted to the hypoproteic diet and recovered showed a reduction in body mass when compared to the animals submitted to the normoprotein diet (p≤0.05). At 7 days there was a reduction of inflammation and TNF-α in the control and malnourished groups for 21 days (p≤0.05), but in the irradiated animals, this result was observed only at 21 days, with no change in TNF-α values. Conjunctival Tissue Density demonstrated the same behavior, but TGF-β1 levels were not influenced by LLLT. The Transverse Section Area and m- Thor increased with LLLT treatment in the final stages of regeneration. With the results of the present study, it can be concluded that low-intensity laser therapy (830 nm) favored muscle regeneration in the late phase (21 days) in an experimental model of postnatal protein malnutrition with subsequent recovery.